细胞培养技术-(第二版)-含学习工作手册 本书特色
本教材以普通高等教育“十一五”*规划教材《细胞培养技术》为基础，融入“工学结合”的办学思路，聘请企业一线专家参与教材建设，开发企业真正用得上的教学内容，项目教学、行为引导式教学、任务驱动式教学等在教材中得到了充分体现。教材中的五个项目均取材于企业(或行业)的真实工作任务，包括VERO细胞的传代培养、鸡胚成纤维细胞的原代培养、CHO细胞的大规模培养、抗人血白蛋白杂交瘤细胞的制备、胡萝卜细胞的悬浮培养，设计了12个工作任务。每个项目都附有与之配套的实训音像资料（时长约1个小时）和学生工作手册，为教材使用者的自主学习提供了方便。本教材适合高等职业院校生物技术相关专业使用，也可作为生物技术人员的参考书和培训教材。
细胞培养技术-(第二版)-含学习工作手册 目录
**部分动物细胞培养
动物细胞培养概述2
一、动物细胞培养的基本概念及优缺点2
二、动物细胞培养发展史4
三、动物细胞培养的应用6
四、动物细胞培养工作的基本要求和工作方法8
【难点自测】9
项目一VERO细胞的传代培养10
【项目介绍】10
一、项目背景10
二、学习目标10
三、项目任务10
【项目实施】10
任务一VERO细胞培养前的准备10
·**知识11
一、培养细胞的生长条件11
二、动物细胞培养设备14
三、动物细胞培养用品18
四、动物细胞培养用液25
五、动物细胞培养常用的消毒和无菌处理方法31
·操作规程34
一、动物细胞培养常用设备的使用34
二、动物细胞培养用品的清洗、包装和灭菌36
三、动物细胞培养用液的配制和无菌处理39
四、动物细胞培养的无菌操作41
任务二VERO细胞的传代和观察43
·**知识43
一、动物细胞传代培养技术43
二、培养细胞的细胞生物学45
三、培养细胞的观察和检测技术52
·操作规程58
一、VERO细胞的传代培养58
二、VERO细胞的常规观察59
任务三VERO细胞的冻存和复苏60
·**知识60
一、细胞的冻存60
二、细胞的复苏61
三、细胞活性检查61
四、细胞计数62
· 操作规程63
一、VERO细胞的冻存63
二、VERO细胞的复苏64
三、VERO细胞的活性检查65
【项目拓展知识】66
一、动物细胞培养实验室的设计与布局66
二、动物细胞培养的其他常用液67
三、培养细胞的运输和短期保存68
【项目难点自测】69
项目二鸡胚成纤维细胞的原代培养71
【项目介绍】71
一、项目背景71
二、学习目标71
三、项目任务71
【项目实施】71
任务一组织块法培养鸡胚成纤维细胞71
·**知识71
一、培养细胞的取材72
二、组织块培养法73
·操作规程74
一、操作用品74
二、操作步骤75
任务二消化法培养鸡胚成纤维细胞76
·**知识76
一、组织材料的分离76
二、消化培养法77
·操作规程78
一、操作用品78
二、操作步骤78
【项目拓展知识】79
一、正常组织细胞的培养79
二、肿瘤细胞培养82
【项目难点自测】85
项目三CHO细胞的大规模培养87
【项目介绍】87
一、项目背景87
二、学习目标87
三、项目任务87
【项目实施】88
·**知识88
一、动物细胞大规模培养技术概述88
二、动物细胞大规模培养的方法89
三、动物细胞培养反应器96
四、动物细胞大规模培养技术的操作方式100
·操作规程101
【项目拓展知识】105
一、植物细胞大规模培养技术的概念105
二、植物细胞大规模培养的应用和工业前景105
三、植物细胞大规模培养流程107
四、植物细胞的规模化培养体系的建立107
五、植物细胞的大规模培养方法109
六、植物细胞生物反应器111
【项目难点自测】113
项目四抗人血白蛋白杂交瘤细胞系的制备115
【项目介绍】115
一、项目背景115
二、学习目标115
三、项目任务115
【项目实施】115
任务一人血白蛋白免疫小鼠的准备115
·**知识115
一、单克隆抗体的概念115
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理116
三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程116
四、动物免疫116
·操作规程117
一、操作用品117
二、操作步骤117
任务二骨髓瘤细胞和脾细胞的融合118
·**知识118
一、脾细胞、骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备118
二、细胞融合和杂交瘤细胞的筛选119
·操作规程121
一、操作用品121
二、操作步骤121
任务三抗人血白蛋白杂交瘤细胞的筛选124
·**知识124
一、酶联免疫吸附法124
二、双向扩散法124
·操作规程125
任务四抗人血白蛋白杂交瘤细胞的克隆培养126
·**知识126
一、有限稀释法127
二、软琼脂平板法127
三、显微镜操作法127
四、荧光激活分离法127
·操作规程128
【项目拓展知识】128
一、杂交瘤技术的诞生128
二、杂交瘤细胞株的冻存和复苏129
三、单克隆抗体的大量制备与纯化129
四、细胞的基因转染技术130
【项目难点自测】132
第二部分植物细胞培养
植物细胞培养概述136
一、植物组织培养136
二、植物细胞培养137
三、植物组织细胞培养的发展史138
四、植物组织细胞培养的应用140
【难点自测】142
项目五胡萝卜细胞的悬浮培养144
【项目介绍】144
一、项目背景144
二、学习目标144
三、项目任务144
【项目实施】145
任务一MS培养基的制备145
·**知识145
一、植物细胞培养的实验室条件145
二、植物细胞培养的培养基150
·操作规程156
任务二胡萝卜愈伤组织的诱导159
·**知识159
一、外植体的选择和预处理159
二、植物愈伤组织培养的形成过程161
三、植物愈伤组织培养的一般程序162
四、植物组织细胞培养的无菌操作163
·操作规程163
任务三胡萝卜细胞的悬浮培养164
·**知识164
一、单细胞的分离164
二、悬浮培养细胞的生长和测定166
三、悬浮培养细胞的同步化167
四、植物细胞培养的环境条件167
·操作规程169
【项目拓展知识】170
一、植物细胞的固定化培养170
二、植物单细胞培养172
【项目难点自测】174
附录细胞培养技术常用术语中英文对照177
参考文献 182
细胞培养技术-(第二版)-含学习工作手册 作者简介
兰蓉，北京电子科技职业技术学院，北京市教学名师、生物工程学院教授，在生物技术专业人才培养中有自己独到的见解，对培养目标、培养规格和课程体系剖析透彻。
