植物细胞工程 内容简介
本教材注重植物细胞工程的基本理论、基本知识和基本操作技术，理论联系实际。全书系统论述了植物器官、组织、细胞、原生质体离体培养原理和方法，细胞融合、细胞重组、基因重组以及被子植物精与卵的分离、培养与融合等遗传操作技术。结合内容简要介绍了过去一个世纪国内外植物组织细胞离体培养的研究成果、今后的发展方向和应用前景。
本书系作者多年教学和科研工作积累，精心编写而成，可供生物工程技术类专业用作教材，亦可供其他相关专业师生参考。
植物细胞工程 目录
引言
**节 生物技术的含义及其发展简史
第二节 生物技术的基本内容
一、细胞工程
二、基因工程
三、酶工程
四、发酵工程
第三节 生物技术与其他基础学科的关系及其应用前景
一、生物技术在农业(农、林、牧、副、渔)上的应用
二、生物技术在医药上的应用
三、生物技术在解决能源危机、治理环境污染方面的应用
四、生物技术在工业上的应用
**章 植物细胞工程基本原理
**节 植物细胞的形态和结构
一、植物细胞的形状和大小
二、植物细胞的结构
第二节 植物细胞的繁殖
一、有丝分裂
二、无丝分裂
三、减数分裂
第三节 植物细胞的全能性理论
一、植物细胞的生长
二、植物细胞的分化与脱分化
三、愈伤组织中细胞的再分化与驯化
四、植物的再生作用
五、植物的遗传与变异
第二章 植物细胞工程基本设备及操作技术
**节 实验室规模、设备及用品
一、实验室规模
二、实验室设备及用品
三、实验用品的洗涤
第二节 植物细胞工程基本操作技术
一、培养基及其配制
二、外植体选择
三、接种
四、培养、观察与记载
五、炼苗与移栽
第三章 植物体外形态发生
**节 愈伤组织
一、愈伤组织的形成
二、愈伤组织的生长
第二节 植物离体形态发生
一、器官发生途径
二、胚胎发生途径
三、植物离体培养中形态发生调控
第三节 人工种子的研制
一、人工种子的优越性及其研制中存在的问题
二、胚状体的高频率发生与同步化培养
三、人工种皮和人工胚乳的研制
四、人工种子的制作
第四章 植物无性系快速繁殖与无病毒种苗生产
**节 植物无性系快速繁殖
一、植物无性系快速繁殖的意义和应用
二、植物无性系快速繁殖的途径与方法
三、植物快速繁殖的关键技术环节
四、植物快速繁殖的影响因子
五、兰花的快速繁殖操作实例
第二节 植物脱毒与无病毒种苗的生产
一、植物脱毒的意义
二、植物脱毒技术
三、马铃薯茎尖脱毒操作实例
第五章 植物单细胞培养与突变体的筛选
**节 植物单细胞的分离
一、由外植体分离单细胞
二、由愈伤组织分离单细胞
第二节 植物单细胞培养方法
一、单细胞培养的方法
二、影响单细胞培养的因素
第三节 植物细胞突变体的筛选
一、细胞突变体的特征
二、细胞突变体筛选的意义
三、细胞突变体筛选的一般技术
四、突变体筛选操作实例
第六章 植物细胞悬浮培养与次生代谢物质生产
**节 细胞的初始培养
一、悬浮细胞的来源
二、细胞的振荡培养
三、建立良好悬浮细胞系的技术要点
第二节 高产细胞系筛选
一、高产细胞系筛选的整体思路
二、高产细胞系的筛选方法
三、高产细胞系的稳定性及保存方法
第三节 植物细胞悬浮培养方法
一、细胞悬浮培养的类型
二、细胞悬浮培养的培养基
三、悬浮培养细胞的同步化
四、悬浮培养中细胞的生长量和活力分析
第四节 植物次生代谢物质生产
一、植物次生代谢产物的主要类型
二、生物反应器培养水母雪莲细胞产生黄酮类化合物操作实例
第七章 植物原生质体培养与体细胞杂交
**节 植物原生质体的分离与纯化
一、材料的选择和预处理
二、分离植物原生质体的酶类及其纯化
三、酶液的配制与渗透压的调控
四、原生质体的分离、纯化与活力检测
五、亚原生质体的制备
第二节 植物原生质体的培养
一、供体材料的选择
二、原生质体培养基
三、培养原生质体的植板密度
四、原生质体的培养条件
五、原生质体的培养方式
六、原生质体培养中的形态发生
第三节 植物细胞融合与体细胞杂交
一、细胞融合
二、体细胞杂种的筛选和鉴定
第八章 植物细胞重组(拆合)与基因重组
**节 细胞重组(拆合)
一、细胞重组的概念、发展和意义
二、细胞重组方式
三、核移植技术
四、植物微核技术
五、细胞器移植
第二节 基因重组
一、染色体数目变异
二、染色体结构变异
三、基因突变
四、利用非整倍体技术进行异源基因的转移
五、染色体微切割
第九章 花药、花粉培养与单倍体育种
**节 花药培养
一、培养基
二、花药培养操作程序
三、雄核发育过程和植株再生
四、影响雄核发育的因子
五、水稻花药培养操作实例
第二节 花粉培养
一、花粉的分离方法
二、花粉的培养方法
三、茄子花粉培养操作实例
第三节 单倍体育种
一、单倍体育种的优越性
二、单倍体植物的产生
三、单倍体植株的染色体加倍技术
第十章 子房、胚珠培养与试管受精
**节 子房培养
第二节 胚珠培养
第三节 未授粉子房和胚珠培养
一、植物雌性单倍体离体诱导研究概况
二、雌核发育的胚胎学
三、影响未受精胚珠与子房培养的因素
第四节 试管受精
一、植物的子房内授粉
二、雌蕊的离体授粉
三、胚珠的试管受精
四、植物试管受精的意义
第十一章 被子植物的精、卵分离，培养与融合
**节 精子的分离与培养
一、生殖细胞的分离
二、精子的分离
三、精子的纯化
四、精子生活力的测定与保存
五、精子的培养
第二节 卵细胞的分离与培养
一、卵细胞的分离方法
二、卵细胞的培养
第三节 精、卵融合与培养
一、精、卵细胞融合方法
二、影响融合的因素
三、精、卵融合后的培养
第十二章 胚胎培养与胚乳培养
**节 胚胎培养
一、合子胚培养的方法
二、幼胚培养的条件
三、胚乳的看护培养
第二节 胚乳培养
一、外植体的选择与接种
二、愈伤组织诱导
三、器官发生
四、胚乳胚状体发生
五、培养条件
六、胚乳愈伤组织的细胞学特征
第三节 无融合生殖
一、单倍体无融合生殖
二、二倍体无融合生殖
三、不定胚生殖
四、无融合生殖的鉴别
五、无融合生殖的应用
主要参考文献
植物细胞工程 节选
**章 植物细胞工程基本原理
单细胞植物由一个细胞组成，这一个细胞就是一个独立的生命单位，所有生命活动包括物质的合成、降解和转化，都在这一个细胞中进行。多细胞植物体中的细胞出现了分工，形成了组织，各自担负了不同的功能，但是细胞还是组成植物体的基本结构单位和功能单位，很多生命活动都是以细胞为单位进行的。细胞之间相互依赖、相互制约，形成整体。
植物细胞工程是将植物学、植物生理学、植物遗传学、植物细胞学、植物分子生物学基本理论与工程技术原理结合，通过离体无菌培养，将植物细胞或植物体当作一座反应器，进行物质的合成、降解和转化；对植物细胞在细胞或亚细胞水平上，进行遗传修饰，从而改变植物的遗传特性，创造人类所需要的植物品种或具有某些新性状的细胞群体。植物细胞工程是现代生物技术中的重要组成部分。
植物细胞工程的理论基础是细胞学说（cell theory）和细胞全能性（celltotipotency）理论。
细胞学说是19世纪自然科学三大发现之一。1838年德国植物学家施莱登（Schleiden M J）根据自己在植物中的观察发表了《植物发生论》，论证了所有植物体都是由细胞组合而成的。l839年德国动物学家施旺（Schwann M J）也根据自己独立的工作，认为动物体也是由细胞组成的，并发表了《关于动植物的结构和生长的一致性的显微研究》的论文。他们正式提出了“细胞学说”：认为“一切植物、动物都是由细胞组成的”。但他们对细胞的来源认识不清，错误地认为新细胞是由连续的、无定形的“细胞形成质”结晶而成的。1841年瑞士的Albert K011iker证明精子在组织学上也是一种细胞，是在机体中产生的；1844年他又把这一概念推广到卵，卵通过细胞分裂而发育成有机体。1855年德国的Virchow R在胚胎发育的研究．中发现，在生长期间细胞本身进行复制，一个母细胞产生两个子细胞，这一过程称为细胞分裂。他观察后提出：哪里有细胞存在，哪里就一定有先前存在过的细胞，正如同动物只能来自动物，植物只能来自植物一样。明确提出了“细胞来自细胞”的观点，使细胞学说更趋完善。细胞学说可概括为以下要点：①细胞是多细胞生物的*小结构单位，原生生物本身就是一个细胞单位；②细胞只能来自于细胞；③细胞分裂可形成组织；④精子和卵是细胞。
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