(第三版)分子生物学技术在中医药研究中的应用 本书特色
本教材从实用性和新颖性角度出发，介绍了若干目前国内外应用较多的先进技术，以及一些常用的分子生物学技术及其在中医药研究中的应用。主要包括绪论、分子生物学常用基本技术、DNA的研究方法、RNA的研究方法、蛋白质的研究方法、基因功能与表达调控的研究方法、分子生物学技术中常用的细胞生物学技术、分子生物学技术常用网络资源及利用8部分内容。
(第三版)分子生物学技术在中医药研究中的应用 内容简介
本书深入浅出地介绍分子生物学常用技术及其在中医药研究中的运用，着重解决中医药研发中能否用、为何用、如何用的问题。突出实用、先进和中医特色三个方面。
(第三版)分子生物学技术在中医药研究中的应用 目录
**章绪论001
**节分子生物学技术在中医药防治肝癌作用机制探索中的应用001
第二节分子生物学技术在中医药研究中的应用现状007
第三节中医药研究中常用的分子生物学技术013
第四节分子生物学技术在中医药研发中的应用前景020
第二章分子生物学常用基本技术026
实验1重组质粒026
实验2质粒转化大肠杆菌030
实验3阳性单菌落扩增与小量DNA制备034
实验4酶切重组质粒和电泳分离所插入的DNA037
实验5从凝胶中回收DNA040
实验6大量质粒DNA制备041
第三章DNA的研究方法045
实验7哺乳类动物组织基因组DNA的提取045
实验8基因组文库的建立与目的基因筛选048
实验9Southern blot058
实验10PCR064
实验11DNA双脱氧链终止法测序070
第四章RNA的研究方法077
实验12哺乳类动物组织总RNA的提取079
实验13mRNA的分离081
实验14Northern blot084
实验15RTqPCR090
实验16多基因表达的检测096
实验17cDNA库建立112
实验18基因全序列cDNA库筛选123
第五章蛋白质的研究方法132
实验19哺乳类动物组织蛋白质的提取132
实验20Western blot136
实验21ELISA149
实验22免疫组织化学154
实验23蛋白质双向电泳160
实验24蛋白芯片178
第六章基因功能与表达调控的研究方法182
实验25RNAi183
实验26报告基因与基因调控元件的检测189
实验27体外定点诱变技术192
实验28CRISPRCas9基因编辑技术195
实验29基因过表达204
实验30免疫共沉淀211
第七章分子生物学实验常用的细胞生物学技术216
实验31哺乳类动物细胞的培养216
实验32细胞增殖检测224
实验33流式细胞术226
实验34体外细胞划痕实验234
实验35细胞迁移和侵袭实验236
实验36TUNEL法检测细胞凋亡239
第八章分子生物学常用网络资源及利用243
**节美国国家生物技术信息中心（NCBI）243
第二节GenBank数据库查询与搜索248
第三节BLAST255
第四节EST的电子延伸265
第五节cDNA序列的蛋白阅读框架分析、染色体定位及其在机体各组织中的表达
预测271
第六节PCR引物或序列寡核苷酸探针的在线设计278
第七节蛋白质分析280
附录287
1分子生物学实验常用仪器设备287
2常用生物学数据288
3常用载体292
4分子克隆常用酶293
5常用储存液的配制297
6常用液体培养基299
7常用缓冲液300
8常用酸碱溶液的浓度与分子量300
9不同浓度酸碱液的pH301
10核酸的纯化（用酚氯仿抽提）301
11核酸浓缩302
12分光光度法测定DNA及RNA含量303
13Sephadex 的水化303
14放射性度量单位和数据303
15科学单位303
16离心速度和离心力换算304
17常用分子生物学术语对照304
(第三版)分子生物学技术在中医药研究中的应用 作者简介
方肇勤，上海中医药大学教授，博导。任中华中医药学会基础理论分会全国副主任委员、上海中医药学会中医基础学分会主任委员；国家教学团队“中医基础教学团队”带头人、国家中医药管理局“中医基础重点学科”带头人、国家中医药管理局“细胞与分子生物学实验室”主任、任实验中医学教研室主任。全国模范教师、上海市教学名师、上海市优秀教育工作者，1994起享受国务院特殊津贴。
长期从事中医实验教学，将科研成果转化为教学，所负责的“实验中医学”先后评为国家精品课程和上海市精品课程，所负责的课程建设先后荣获国家教学成果二等奖和上海市教学成果一等奖。主编有《实验中医学》、《分子生物学技术在中医药研究中的应用》、《中医药研究常用分子生物学技术》全国统编教材，指导研究生50余人。
所主持的国家到地方的各级科研项目十数项；所主持科研成果先后荣获国家科技进步二等奖、国家中医药管理局科技进步一等奖、中国实验动物科学技术奖三等奖、中国中西医结合学会科技进步三等奖、中华中医药学会科技进步三等奖等国家及部级科技奖励。主编《中医辨证论治学》、《大鼠/小鼠辨证论治实验方法学》等专著；发表学术论文270余篇。
