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实验过敏反应学

2020-08-07 00:00:00

实验过敏反应学内容简介本书系统深入地介绍了过敏反应学的实验技术及其新研究进展，从实验背景知识、实验材料、实验方法、注意事项等方面论述了每一个实验，力求使读者能够按照我们介绍的步骤进行实验时得到满意的结果。全书分为细胞生物学技术在过敏反应学中的应用、生物化学与分子生物学技术在过敏反应学中的应用、蛋白质组学与生物信息学在过敏反应学中的应用、抗体技术在过敏反应学中的应用、过敏反应相关的动物实验模型、临床相关的过敏反应学实验技术以及常见过敏原的收集与鉴定六个部分共15章。本书由从事过敏反应学基础研究和临床检验领域的专家编著，可供从事过敏反应学的科研工作者、临床医学工作者参考，也可作为医学院校的授课教材使用。实验过敏反应学目录序前言篇细胞生物学技术在过敏反应学中的应用第1章过敏反应相关细胞的分离、纯化、培养、鉴定节细胞分离、纯化、培养、鉴定的基本原理第二节树突状细胞的分离、纯化、培养、鉴定第三节 t、b淋巴细胞的分离、纯化、培养、鉴定第四节肥大细胞的分离、纯化、培养、鉴定第五节嗜碱性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定第六节嗜酸性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定第七节中性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定第八节单核／巨噬细胞的分离、纯化、培养、鉴定第九节上皮细胞的分离、纯化、培养、鉴定第十节内皮细胞的分离、培养、纯化、鉴定第十一节呼吸道平滑肌细胞的分离、纯化、培养、鉴定第十二节成纤维细胞的分离、纯化、培养、鉴定第十三节干细胞的培养第十四节细胞的冻存与复苏第十五节神经胶质细胞的分离、纯化、培养、鉴定第十六节血小板的分离、纯化、培养、鉴定参考文献第2章过敏反应相关的细胞功能实验节肥大细胞激发实验第二节嗜碱性粒细胞激发实验第三节黏液分泌细胞刺激实验第四节 t、b细胞激发实验第五节树突状细胞激发实验第六节内皮细胞激发实验第七节成纤维细胞激发实验第八节神经胶质细胞激发实验第九节细胞趋化性和细胞膜通透性实验第十节细胞增殖实验第十一节呼吸道平滑肌激发、收缩实验第十二节细胞凋亡实验参考文献第3章细胞成分的标记和检测节常用组织和细胞取材及固定方法第二节组织切片的制备第三节组织化学染色第四节免疫组织化学染色第五节免疫组织化学双重或多重标记第六节酶-底物染色第七节原位杂交染色第八节免疫胶体金染色第九节激光共聚焦显微镜技术第十节流式细胞术第十一节细胞内钙离子水平测定第十二节鉴定细胞信号转导通路的常用技术参考文献第二篇生物化学与分子生物学技术在过敏反应学中的应用第4章过敏反应相关的蛋白质纯化技术节过敏原蛋白质组分的提取与制备第二节蛋白质电泳技术第三节点杂交和免疫印迹第四节蛋白质的分离与纯化第五节蛋白质浓度测定第六节蛋白酶活性测定第七节蛋白质一级结构的测定方法第八节蛋白质的分子质量测定第九节过敏原生物学功能鉴定第十节表面等离子体共振技术参考文献第5章过敏反应相关的分子生物学技术节常规分子生物学技术第二节普通pcr及荧光定量pcr技术第三节重组蛋白表达与纯化第四节细胞转染第五节 cdna文库的建立第六节 northern blot和southern blot 第七节反义rna技术第八节 rna干扰技术第九节表位确定第十节限制性片段多态性技术、单链型多态性技术、单核苷酸多态性技术第十一节点突变技术在低过敏原性疫苗中的应用第十二节 microrna技术参考文献第三篇蛋白质组学与生物信息学在过敏反应学中的应用第6章蛋白质组学技术及在过敏反应学中的应用节过敏原蛋白质组分的双向电泳分离技术第二节过敏原蛋白质的质谱分析和鉴定技术第三节过敏原蛋白质组学研究的策略与方法参考文献第7章生物信息学在过敏原研究中的应用节生物信息学的主要研究内容第二节生物信息学在过敏反应学中的应用参考文献第四篇抗体技术在过敏反应学中的应用第8章抗体制备节抗体制备的目的及基本原理第二节多克隆抗体制备第三节单克隆抗体制备第四节抗体的纯化与鉴定参考文献第9章基因工程抗体节抗体工程第二节抗体的修饰和标记参考文献第五篇过敏反应相关的动物实验模型第10章哮喘相关的动物实验模型节豚鼠支气管哮喘模型第二节小鼠支气管哮喘模型第三节大鼠支气管哮喘模型第四节狗哮喘模型第五节灵长类哮喘模型第六节猫哮喘模型第七节兔哮喘模型第八节绵羊哮喘模型参考文献第11章过敏性鼻炎相关的动物实验模型参考文献第12章其他动物实验模型节大鼠足跖肿胀模型第二节大白鼠皮肤毛细血管通透性模型第三节小白鼠腹腔炎症性细胞浸润模型第四节大白鼠皮肤炎症性细胞浸润模型第五节实验性过敏性脑脊髓炎模型第六节过敏性肠炎模型参考文献第六篇临床相关的过敏反应学实验技术第13章体液或培养液中特异性成分的测定节组胺水平测定第二节酶联免疫吸附测定第三节酶联免疫斑点法第四节放射免疫分析法第五节 immunocap系统第六节血清食物特异性igg的检测第七节白三烯测定第八节过敏性皮炎模型第九节皮肤斑贴实验参考文献第14章吸入性过敏原的收集与鉴定节吸入性过敏原的收集第二节吸入性过敏原的鉴定参考文献第15章食入性过敏原的收集与鉴定节食入性过敏原的收集第二节食入性过敏原的鉴定参考文献中英文索引实验过敏反应学节选《实验过敏反应学》系统深入地介绍了过敏反应学的实验技术及其新研究进展，从实验背景知识、实验材料、实验方法、注意事项等方面论述了每一个实验，力求使读者能够按照我们介绍的步骤进行实验时得到满意的结果。全书分为细胞生物学技术在过敏反应学中的应用、生物化学与分子生物学技术在过敏反应学中的应用、蛋白质组学与生物信息学在过敏反应学中的应用、抗体技术在过敏反应学中的应用、过敏反应相关的动物实验模型、临床相关的过敏反应学实验技术以及常见过敏原的收集与鉴定六个部分共15章。《实验过敏反应学》由从事过敏反应学基础研究和临床检验领域的专家编著，可供从事过敏反应学的科研工作者、临床医学工作者参考，也可作为医学院校的授课教材使用。实验过敏反应学相关资料插图：上皮细胞细胞之间以及上皮细胞与成纤维细胞之间连接紧密，上皮细胞所用的消化酶的浓度与消化时间不易掌握。若消化酶的浓度与消化时间控制不好，使消化不到位，则分离下来的细胞数量较少；消化过度则可能将黏膜层的成纤维细胞连带消化下来，同时可能破坏已消化下来的细胞膜的完整性，影响已分离的上皮细胞的质量，不能很好地贴壁、增殖与应用。使用酶消化联合机械刷洗法分离培养，不仅简化操作过程，减少污染概率，也使细胞在酶的消化作用下易于脱落，稍加刷洗即可得。采用链酶蛋白酶消化时，细胞易于分散脱落，且对细胞损伤相对较小，结合细胞刷刷洗，不仅可大量回收基底层细胞，且提高了上皮细胞的收获量与存活率。秦晓群等分别比较了酶消化法、机械刷洗以及消化后刷洗3种方法分离家兔气管一支气管上皮细胞，结果表明消化后刷洗方法可得到的细胞数量与存活率高于前两种方法。利用酶消化联合机械刷洗法获得的上皮细胞纯度与成活率高，收获的细胞数量较多，避免了单纯消化法的细胞得率低、纯度低及存活率低的缺点，尤其是单纯刷（刮）洗方法难免会将成纤维细胞一起刷洗下来。成纤维细胞与上皮细胞共存状态下会造成上皮细胞生长抑制。经改良的无血清完全F12培养基更适合上皮细胞培养，无血清培养可提高培养上皮细胞的纯度，促进细胞融合，细胞生长状态良好。实验过敏反应学作者简介何韶衡，1957年出生，四川三台县人，博士，教育部“长江学者”特聘教授。曾在英国、美国留学12年，获英国皇家学会奖励及英国南安普顿大学超聘一级工资的奖励。1999年在世界著名的英国南安普顿大学呼吸细胞与分子生物学分豌任高级研究员，博士生导师，是分院领导中唯一的亚裔成员。现任南京医科大学第一附属医院临床实验研究中心主任。变态反应研究所所长，江苏省医学领军人才，中国协和医科大学客座教授。主要从事过敏性疾病发病机制的研究及过敏性疾病诊治手段的研发工作，是国际知名专家，2009年入选Who s who in the World。

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