基因工程
基因工程作者:何永林 主编 开 本:16开 书号ISBN:9787030212283 定价:28.0 出版时间:2008-05-01 出版社:科学出版社 |
一、重组DNA导入大肠杆菌的方法
二、重组DNA导入真核细胞的方法
三、转化率及其影响因素
第三节 重组子的筛选与鉴定
一、载体表型选择法
二、根据插入基因的表型选择法
三、DNA电泳检测法
四、PCR检测法
五、核酸杂交检测法
六、免疫化学检测法
七、DNA序列分析
思考题
第七章 外源基因的表达及其优化策略
**节 影响外源基因表达的因素
一、阅读框架对转化基因表达的影响
二、顺式作用元件对基因表达的影响
三、翻译过程对表达的影响
四、表达系统对表达产物的影响
第二节 外源基因在原核细胞中的表达
一、原核生物基因表达与调控的特点
二、原核生物基因表达载体的组成特征
三、原核生物基因表达的受体系统
四、优化外源基因在原核细胞中表达的策略
第三节 外源基因在真核细胞中的表达
一、真核生物基因表达与调控的特点
二、真核生物基因表达载体的组成特征
三、真核表达的受体系统
四、优化外源基因在真核细胞中表达的策略
思考题
第八章 外源基因表达产物的分离纯化
**节 重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则
一、纯化策略的制定
二、层析类型的选择
三、多种分离纯化技术的联合应用
四、合适分离纯化介质的选择
五、分离纯化过程的规模
第二节 不同表达形式的蛋白质分离纯化
一、分离纯化的一般步骤
二、大肠杆菌表达的重组蛋白质的分离纯化
三、哺乳动物细胞表达的重组蛋白质的分离纯化
第三节 重组蛋白质的质量检测
一、重组蛋白质的质量控制指标
二、重组蛋白的质量检测项目与方法
三、重组蛋白质的保存
思考题
第九章 基因工程的应用
**节 植物基因工程的应用
一、植物基因工程技术流程
二、植物基因工程的应用
三、基因工程与常规育种相结合进行作物遗传改良
第二节 动物基因工程的应用
一、动物基因工程的技术流程
二、动物基因工程的应用
第三节 微生物基因工程的应用
一、微生物基因工程的技术流程
二、微生物基因工程的应用
思考题
第十章 基因工程及其产品安全性管理
**节 基因工程的安全性问题
一、基因工程产品对人类健康的安全性
二、基因工程对生态系统的安全性
三、转基因生物与农业生产的安全性
四、基因工程与伦理道德
五、基因工程与动物权益保护
第二节 基因工程的安全性评价
一、基因工程生态安全性评价
二、基因工程食品安全性评价
第三节 基因工程安全管理
一、生物安全管理
二、中国转基因生物的安全管理
思考题
主要参考文献
基因工程 节选
**章 绪论
基因工程是20世纪70年代在分子遗传学、细胞生物学基础上发展起来的,是一种可以按照人们的意愿设计、改造和组建生物品种的新技术。虽然问世不久,但已充分显示出无限的生命力,它将对自然界和人类社会生活产生广泛而深远的影响。
**节 基因工程的内容与应用
一、基因工程的概念
基因工程是通过基因操作,将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生
物细胞,通过复制、转录、翻译外源目的基因以及蛋白质的活性表达,使转基因生物获得新的遗传性状的操作。基因工程的目标是实现转基因生物性状的定向改良,技术上包括基因或DNA的体外重组、转基因、重组子筛选与扩大繁殖等多个环节,目的性和技术性都很强,需要严密的实验设计。
基因工程具有以下几个重要特征:①打破物种的界限,实现跨物种的基因转移;②通过已知功能基因的遗传转化,可进行物种的定向改良;③可以创造出自然界中原本没有的生物。
在不严格的情况下,有时又把基因工程称为基因操作、遗传工程或基因克隆,但严格来说它们的意义是有差别的。基因操作泛指对基因进行酶切、连接、转化等分子生物学操作,是基因工程的技术基础;基因克隆是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程,其目的在于获得大量的基因拷贝,它在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节,很多时候并不涉及动物、植物等的转化及性状的遗传改良,显然与基因工程不完全一致;广义的遗传工程是指所有能改变生物体遗传性状的技术,包括常规的有性杂交育种、染色体工程、细胞工程以及基因工程等。
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