四、特异性寡核苷酸片段标记法146

五、基因芯片法146

六、荧光定量PCR检测法147

第三节内生菌的定殖研究实例147

参考文献149



第七章内生菌的活性评价方法/151

**节内生菌杀虫活性评价方法151

一、触杀作用评价方法151

二、胃毒作用评价方法152

三、螨类的评价方法154

四、酶活评价方法155

第二节内生菌抑菌活性评价方法166

一、内生菌离体活性评价方法166

二、内生菌组织活性评价方法171

三、内生菌盆栽活性评价方法174

第三节内生菌抗氧化活性评价方法176

一、TLC法检测自由基清除活性176

二、高价铁离子还原作用176

三、DPPH自由基清除作用176

四、ABTS自由基清除作用177

五、超氧阴离子清除作用177

六、羟基自由基清除作用177

七、过氧化氢清除作用178

八、实例蜂巢珊瑚内生真菌的抗氧化活性研究178

第四节内生菌诱导靶标菌细胞凋亡评价方法181

一、对细胞内氧化应激的评价181

二、对线粒体膜电位的评价182

三、对靶标菌菌体内抗氧化酶系的评价182

四、对细胞内还原型谷胱甘肽含量的评价185

五、对小靶标菌细胞凋亡的诱导186

参考文献187



第八章内生菌的促生作用/190

**节直接促生作用190

一、生长素190

二、固氮作用192

三、解磷作用192

四、解钾作用193

五、分泌铁载体193

第二节间接促生作用194

一、拮抗作用194

二、诱导系统抗性194

第三节促生作用检测198

一、形态指标检测198

二、生理指标检测199

第四节互作效应202

第五节内生菌促生作用研究实例203

实例一链霉菌HN6对香蕉的促生作用研究203

实例二放线菌HN20对黄瓜、生菜的促生作用研究205

实例三放线菌WZS1-1与WZS2-1菌株的促生作用测定208

参考文献211



第九章内生菌代谢产物的研究/213

**节内生菌代谢产物的分离213

一、小分子代谢产物的提取分离213

二、蛋白质的提取分离220

三、多糖的提取分离223

第二节内生菌代谢产物的鉴定225

一、定性鉴定225

二、红外光谱分析法227

三、核磁共振波谱法228

四、质谱分析法231

五、圆二色光谱分析法232

第三节真菌Xylaria feejeenisis的代谢产物研究232

参考文献236



第十章内生菌的应用研究/237

**节内生菌可湿性粉剂的研制237

一、HN6可湿性粉剂的制备方法237

二、可湿性粉剂的制备方法优化239

三、HN6可湿性粉剂对香蕉枯萎病的盆栽防治效果240

四、HN6可湿性粉剂对香蕉枯萎病的田间防治效果241

第二节内生菌可溶性液剂的研制242

第三节内生菌微生物肥料的研制243

一、内生菌液体肥料的研制244

实例一枯草芽孢杆菌HBS-1和白刺链霉菌NLG-3的液体肥料244

实例二HN20的液体肥料244

实例三黄色链霉菌BYM-2的液体肥料244

实例四蜜糖草固氮螺菌SRJ2-4的液体肥料245

二、内生菌固体肥料的研制245

实例一含荧光假单胞杆菌YXG2-3的复合固体肥料245

实例二含芽孢杆菌HBS-1的复合固体肥料246

实例三含岸滨芽孢杆菌BYG2-5的复合固体肥料246

第四节内生菌保鲜剂的研制247

一、香蕉防腐保鲜剂的应用247

二、芒果防腐保鲜剂的应用248

第五节内生菌菌剂的检测249

参考文献252



第十一章内生菌菌种的保藏/253

**节菌种保藏的基本原理253

第二节菌种保藏的基本方法253

一、斜面传代保藏法253

二、矿物油保藏法254

三、麸皮保藏法254

四、沙土管保藏法255

五、土壤培养保藏法256

六、蒸馏水保藏法256

七、甘油悬液保藏法256

八、冷冻干燥保藏法257

九、液氮超低温保藏法257

十、素瓷珠保藏法258

十一、琼脂穿刺保藏法258

十二、固定化保藏法258

十三、宿主保藏法259

第三节菌种保藏的注意事项259

参考文献260



附录262

附录一培养基及配方262

附录二常用酸碱指示剂的配制270

附录三常用消毒剂的配制271

内生菌研究方法 作者简介

骆焱平，海南大学环境与植物保护学院，教授，博导，海南省“515人才工程”第二层次人选；2010年全国百优博士论文提名者。1997年6月毕业于湖北师范学院化学系，获理学学士学位；2000年6月毕业于华中师范大学农药研究所，获理学硕士学位（农药学专业）；2007年6月毕业于华中师范大学农药与化学生物学教育部重点实验室，获理学博士学位（农药学专业）。在农药学、有机化学和化合物结构分析与鉴定方面具有扎实的基础知识。

在教学上，刻苦钻研教学方法，耐心细致进行教学活动。承担包括《化学制药工程》、《农药化学》、《农药剂型与加工》在内的10 余门本科和研究生课程。

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